ELISA Kit通稱為ELISA試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒，可分為定性試劑盒與定量試劑盒。是一種廣泛應(yīng)用在測(cè)定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。
在生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室里，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA） 試劑盒榜上有名。無(wú)論是檢測(cè)細(xì)胞因子、腫瘤標(biāo)志物，還是進(jìn)行臨床診斷，ELISA以其高特異性與便捷性，穩(wěn)坐“定量金標(biāo)準(zhǔn)"的寶座。
ELISA到底是什么？
ELISA的原理其實(shí)可以用四個(gè)字概括：專一與放大。
它利用抗原-抗體特異性結(jié)合的高效性，將目標(biāo)分子（抗原或抗體）固定在微孔板這樣的固相載體上。隨后，通過(guò)連接在抗體上的酶（如辣根過(guò)氧化物酶HRP），催化底物（如TMB）發(fā)生顯色反應(yīng)。
簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，哪怕樣本里的目標(biāo)蛋白濃度極低（低至皮克級(jí)，pg/mL），ELISA也能通過(guò)這種“化學(xué)放大"效應(yīng)，讓無(wú)色底物變成肉眼可見的藍(lán)色或黃色，再通過(guò)酶標(biāo)儀進(jìn)行精準(zhǔn)定量。
ELISA的四大“門派"與選擇
ELISA試劑盒根據(jù)檢測(cè)目標(biāo)和原理，主要分為以下四種類型。
間接法
原理：
將抗原包被在板上，加入待檢抗體（一抗），再用酶標(biāo)二抗進(jìn)行檢測(cè)。
適用場(chǎng)景：
抗體檢測(cè)的主力軍。
雙抗夾心法
原理：
它使用一對(duì)抗體：一個(gè)負(fù)責(zé)捕獲抗原（包被抗體），一個(gè)負(fù)責(zé)檢測(cè)抗原（檢測(cè)抗體），形成“三明治"結(jié)構(gòu)。
適用場(chǎng)景：
檢測(cè)大分子抗原（如細(xì)胞因子IL-6、TNF-α），特異性好。
競(jìng)爭(zhēng)法
原理：
樣本中的抗原越多，與酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體的量就越多，最終顯色越淺。即：信號(hào)強(qiáng)度與抗原濃度成反比。
適用場(chǎng)景：
主要用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原（如激素、藥物殘留），這些分子太小，無(wú)法同時(shí)結(jié)合兩個(gè)抗體。
直接法
原理：
在所有ELISA類型中操作步驟最少，可以理解為抗原的"直接顯影"
適用場(chǎng)景：
抗體篩選與鑒定，是直接法常見的用途之一。
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