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基因組原位雜/交技術(shù)

基因組原位雜/交(Genome in situ hybridization，GISH)技術(shù)是20世紀(jì)80年代末發(fā)展起來(lái)的一種原位雜/交技術(shù)。它主要是利用物種之間DNA同源性的差異，用另一物種的基因組DNA以適當(dāng)?shù)臐舛茸鞣庾瑁诎腥旧w上進(jìn)行原位雜/交。GISH技術(shù)剛開始應(yīng)用于動(dòng)物方面的研究(Pinkel et al.,1986)，在植物上剛開始應(yīng)用于小麥雜/  zhong和栽培種的鑒定(余舜武等 2001；王文奎等 2000)。

熒光原位雜/交技術(shù)

熒光原位雜/交(Fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)技術(shù)是在已有的放射性原位雜/交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種非放射性DNA分子原位雜/交技術(shù)。它利用熒光標(biāo)記的核酸片段為探針，與染色體上或DNA顯微切片上的特異fl-N：~行雜/交，通過(guò)熒光檢測(cè)系統(tǒng)(熒光顯微鏡)檢測(cè)信號(hào)DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的目的DNA序列，進(jìn)而確定其雜/交位點(diǎn)。FISH技術(shù)檢測(cè)時(shí)間短，檢測(cè)靈敏度高，無(wú)污染，已廣泛應(yīng)用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測(cè)等領(lǐng)域。FISH是原位雜/交技術(shù)大家族中的一員，因其所用探針被熒光物質(zhì)標(biāo)記（間接或直接）而得名，該方法在80年代末 被發(fā)明，現(xiàn)已從實(shí)驗(yàn)室逐步進(jìn)入臨床診斷領(lǐng)域。 基本原理是熒光標(biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復(fù)性；通過(guò)熒光顯微鏡觀察熒光信號(hào)可在不改變被分析對(duì)象（即維持其原位）的前提下對(duì)靶核酸進(jìn)行分析。 DNA熒光標(biāo)記探針是其中/常/用的一類核酸探針。利用此探針可對(duì)組織、細(xì)胞或染色體中的DNA進(jìn)行染色體及基因水平 的分析。熒光標(biāo)記控針不對(duì)環(huán)境構(gòu)成污染，靈敏度能得到保障，可進(jìn)行多色觀察分析，因而可同時(shí)使用多個(gè)探針，縮 短因單個(gè)探針?lè)珠_使用導(dǎo)致的周期過(guò)程和技術(shù)障礙。

多彩色熒光原位雜/交技術(shù)

多彩色熒光原位雜/交(Multicolor fluorescence in situ hybridization，mFISH)是在熒光原位雜/交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新技術(shù)，它用幾種不同顏色的熒光素單獨(dú)或混合標(biāo)記的探針進(jìn)行原位雜/交，能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶位，各靶位在熒光顯微鏡下和照片上的顏色不同，呈現(xiàn)多種色彩，因而被稱為多彩色熒光原位雜/交。它克服了FISH技術(shù)的局限，能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因，在檢測(cè)遺傳物質(zhì)的突變和染色體上基因定位等方面得到了廣泛的應(yīng)用(楊明杰等1998)。

原位PCR

原位雜/交細(xì)胞定位和PCR的高靈敏度相結(jié)合的技術(shù)，在細(xì)胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對(duì)靶基因片段進(jìn)行擴(kuò)增，通過(guò)摻入標(biāo)記基團(tuán)直接顯色或結(jié)合原位雜/交進(jìn)行檢測(cè)的方法。